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- 簡(jiǎn)單介紹一下細(xì)胞破碎技術(shù)的機(jī)械法類型有哪些?
- 更新日期：2021-05-24 瀏覽次數(shù)：3473
細(xì)胞破碎技術(shù)是指利用外力破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁，使細(xì)胞內(nèi)容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來(lái)的技術(shù)，是分離純化細(xì)胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)(產(chǎn)品)的基礎(chǔ)。 結(jié)合重組DNA技術(shù)和組織培養(yǎng)技術(shù)上的重大進(jìn)展，蛋白質(zhì)可以大規(guī)模生產(chǎn)。
細(xì)胞破碎技術(shù)的破碎方法可規(guī)納為機(jī)械法和非機(jī)械法兩大類。下面小編簡(jiǎn)單介紹一下細(xì)胞破碎技術(shù)的機(jī)械法類型，如下所示：
高速攪拌珠研磨破碎法
研磨是常用的一種方法，它將細(xì)胞懸浮液與玻璃小珠、石英砂或氧化鋁等研磨劑一起快速攪拌，使細(xì)胞獲得破碎。在工業(yè)規(guī)模的破碎中，常采用高速珠磨機(jī) 。
超聲波破碎法
超聲波破碎法利用超聲波振蕩器發(fā)射的15-25kHz的超聲波探頭處理細(xì)胞懸浮液。 超聲波振蕩器有不同的類型，常用的為電聲型，它是由發(fā)生器和換能器組成，發(fā)生器能產(chǎn)生高頻電流，換能器的作用是把電磁振蕩轉(zhuǎn)換成機(jī)械振動(dòng)。超聲波振蕩器以可分為槽式和探頭直接插入介質(zhì)兩種型式。
高壓勻漿破碎法
高壓勻漿器是常用的設(shè)備，它由可產(chǎn)生高壓的正向排代泵(positive displacenemt pump)和排出閥(discharge valve)組成，排出閥具有狹窄的小孔，其大小可以調(diào)節(jié)。細(xì)胞漿液通過(guò)止逆閥進(jìn)入泵體內(nèi)，在高壓下迫使其在排出閥的小孔中高速?zèng)_出，并射向撞擊環(huán)上，由于突然減壓和高速?zèng)_擊，使細(xì)胞受到高的液相剪切力而破碎。在操作方式上，可以采用單次通過(guò)勻漿器或多次循環(huán)通過(guò)等方式，也可連續(xù)操作。為了控制溫度的升高，可在進(jìn)口處用干冰調(diào)節(jié)溫度，使出口溫度調(diào)節(jié)在20℃左右。在工業(yè)規(guī)模的細(xì)胞破碎中，對(duì)于酵母等難破碎的及濃度高或處于生長(zhǎng)靜止期的細(xì)胞。
振蕩珠擊破碎法
將等體積的小量組織樣品與高密度的ZircoBeads放入可密封的2ml螺旋蓋微量管中，再加入緩沖液與穩(wěn)定成份到1.5ml的體積，用6500RPM振湯機(jī)高速上下振動(dòng)8秒，休息8秒，再振動(dòng)8秒即可。此方法是目前最快且一次可處理最多樣品的方法。 一臺(tái)機(jī)器最多可以在一天處理2400支樣品。對(duì)小量且多樣的人很方便。
通過(guò)以上內(nèi)容，小編希望對(duì)大家了解細(xì)胞破碎技術(shù)有所幫助。